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蛋白表达密码子优化(大肠杆菌/哺乳动物细胞)
发布时间:2025-07-01 08:15:48生物技术与医药研发中,蛋白质的高效表达是实现功能研究、药物开发及产业化生产的关键环节。然而,不同生物系统对密码子的使用偏好差异,常常成为外源蛋白在宿主细胞中高效表达的瓶颈。蛋白表达密码子优化是通过对基因序列的精准调整,使外源基因与宿主细胞的密码子偏好相匹配,从而显著提升蛋白表达效率。
密码子优化:解锁蛋白表达的潜力
遗传密码子共有64种,其中60种负责编码20种氨基酸。但不同生物对密码子的使用存在偏好。例如,在大肠杆菌中,AGA、AGG等密码子使用频率较低,属于稀有密码子。当外源基因在宿主中表达时,如果密码子与宿主偏好不符,会导致翻译过程受阻,影响蛋白表达量。密码子优化就是依据宿主细胞对密码子的偏好,对基因序列进行调整,提高mRNA二级结构稳定性,避免因tRNA不足导致的翻译问题。如调整GC含量,避免过高或过低影响基因表达调控;修改重复序列,降低基因合成难度;优化mRNA二级结构,规避发夹结构等,从而提升蛋白表达效率。
大肠杆菌表达系统:经济高效的选择
大肠杆菌表达系统凭借成本低、增殖快、操作简便等优势,成为应用广泛的蛋白表达平台。其遗传背景清晰,表达系统成熟。在生产小分子蛋白时,优势尤为显著。但原核表达易形成不可溶的包涵体,给后续纯化带来挑战。远泰生物在大肠杆菌密码子优化及表达方面经验丰富。从客户提供目的蛋白序列开始,对稀有密码子、密码子偏好性等因素分析优化,合成基因并测序验证后,克隆至高效表达载体。通过选择不同菌株,优化多种表达条件,提高蛋白可溶性表达,再借助先进的AKTA纯化设备,完成蛋白纯化工作。
哺乳动物细胞表达系统:更接近天然的表达
哺乳动物细胞表达系统,如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和人类胚胎肾(HEK)细胞,能进行复杂的翻译后修饰,表达的蛋白在生物学功能、结构和物理性质上更接近天然蛋白分子,是生物制药领域常用的表达系统。但该系统蛋白表达效率受密码子使用影响大。若靶基因密码子与哺乳动物细胞偏好不匹配,表达效率受限。远泰生物拥有成熟的CHO和HEK293表达体系,通过密码子优化,利用自主研发的载体和表达增强剂,可高效表达外源蛋白,满足包内和包外分泌蛋白的表达需求,从克隆菌株小试表达鉴定,到放大表达纯化质检,提供完整服务流程。
蛋白表达密码子优化不仅优化了基因序列,更优化了蛋白表达的整体效率与质量。远泰生物凭借在大肠杆菌和哺乳动物细胞表达系统的丰富经验与成熟技术,为每一位客户量身定制密码子优化。从基因序列的精细调整到蛋白表达的高效实现,从实验室的小试探索到产业化的放大生产,远泰生物始终以专业的技术、严谨的态度和优质的服务,陪伴客户一路前行。未来,远泰生物将继续深耕蛋白表达领域,不断探索和创新,助力更多科研成果走向应用。

